otu 不要合并OTU表

栏目:游戏 2021-09-20 07:52:05
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今天,有人问我,在对两家公司的一批样本进行测序后,如何合并OTU表进行后续分析。

这个问题以前有几个人问过,现在好像很多人都遇到过这个问题。本文将给出一个简短的回答,并给出我的建议。

首先,不管是不是同一个测序公司,其实没有两个OTU表可以直接合并!原因很简单:两个OTU表中的每个OTU不一定对应一个物种。涉及几个因素:

1.嵌合体的识别和去除在每次操作中都有细微的差别。

2.因为Uparse算法本身比较松散,所以每次运行得到的OTU表会有细微的差别。其余的算法是相似的。

3.每个OTU的代表性序列的选择可能不同。

这导致同一个fasta文件运行Uparse两次,结果不会完全一样,数据量越大,差异越大。

所以直接合并OTU表是没有意义的,需要先和公司合并两次fasta文件,才能得到OTU。

建议

可能一批数据已经在公司测试过好几次了。我的建议是不要合并fasta文件来获取OTU进行分析。

首先要做的是检查不同批次之间是否存在较大差异。

你可以把不同的批次分组,先做PCA或者DCA,看看批次是否明显分开。

如果分离明显,说明样品本身可能发生了变化;还是公司的数据库建设、测序平台等因素对结果有很大影响。测序结果必须谨慎使用!

建议再测试一次~