北京天坛医院
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“我离它最近的时候,还不到10厘米。”经过几个月的接触,北京天坛医院检验科副主任、核酸检测团队负责人路宏谈起了让人感到苍白的新冠肺炎。在过去的半年里,核酸团队和同事们检测了5万多个核酸样本,并毫无遗漏地确认了所有感染者。尤其是在新地方发生聚集性疫情后,他们面对的是大量有新地方接触史的人群、发热病人和感染者。形势复杂,侦破和确诊病例数均破纪录。但是送检的样品都经过北京疾控中心或丰台疾控中心复检,合格率100%!
最近我们走进PCR实验室,走近这群最接近病毒的人。
秘诀:如何从“草”中找出“红花”
对于大多数人来说,咽拭子样本如何在核酸检测报告中变成“阴性”或“阳性”是一个谜。7月初的一天,我们在北京天坛医院的PCR实验室见证了从接收样本到发送报告的过程。
核酸检测实验室又称“PCR”,通过DNA基因追踪系统,扩增特定的DNA片段,快速掌握患者体内的病毒含量。“我们的PCR实验室由试剂制备区、样品制备区和扩增区组成,三个区域相对独立。”路宏介绍,每次检测前,检测人员应根据待测样品数量在试剂准备区配置试剂。
“样本来了。”上午,专车运输人员通过专用电梯将几个转运箱运送到实验室。用密封袋包裹的采样管整齐地装在盒子里,刚采集的咽拭子样本在采样管里。打开盒盖,一股酒味扑鼻而来。
测试人员穿戴全套防护装备再次对样品外包装进行消毒,然后迅速转移至实验室内部的转移箱,通过专用通道送往新冠肺炎检测实验室。每个待测样品都需要在样品制备区进行检查和收集,并在56摄氏度下灭活30分钟。灭活后,让样品静置几分钟,检查员用轻柔的动作慢慢打开密封袋,轻轻取出采样管进行核酸提取。
在比手机大不了多少的深孔板上,密集分布着96个孔。除1份阳性对照样品和3份阴性对照样品外,检查人员应准确地将提取的样品滴入其他小孔中,至少一个“滴”只有5微升,稍有不慎就会影响检测结果。
提取准备完成后,在计算机上提取核酸,提取完成后将提取的核酸加入到准备好的试剂中。然后通过转移窗进入扩增区,在程序化荧光PCR仪中进行PCR反应。检测时间一般在一个半小时左右。结果生成后,检验人员需要根据试剂盒规范标准解读反应曲线,整个检测过程往往持续4-6小时。
“人员情况复杂、人数众多,对疑似病例核酸检测结果的要求越来越高。必须做到“快”“准”,第一时间做出准确诊断,让传染病和疾控部门第一时间隔离患者,开展流行病学调查。对密接人员采取相应措施,有效防止病毒再次传播。”北京天坛医院检验科主任张国军说。
邵和都是核酸检测团队的“元老”,他们都经历过一次检测。“早上接手后,我们开始处理样品。这些样本中没有疑似患者或其他需要‘特别关注’的人,他们感到‘好运’。”然而,当几个小时后对样品进行测试,需要解释响应曲线时,发生了事故。
“有一个样本曲线变化很明显,但CT值很大,接近‘灰色区域’。”王丽娟表示,曲线变化明显为正,但“灰色区域”意味着无法准确判断该样品,这可能是由于样品污染或荧光试剂泄漏所致。为了防止“假阳性”,检查员必须重新检查操作。
两人立即对检测设备和检测过程进行复检,并立即用另一种试剂对原始标本进行复检。在另一种试剂的测试结果中,他们看到了同样明显的曲线上升。
“我们可以确定这个样本是阳性的。”王丽娟表示,患者无明显临床症状,CT检查后肺部无明显变化。由于我们的报告准确,临床科室及时采取了隔离措施,防止疫情扩散。
“每天面对成千上万的样本,我们就像一望无际的‘草原’,我们只想从这片‘草原’中找到‘红花’,哪怕它藏得更深。”王丽娟说。
“我们建立了完整的质量评价体系,对设备和试剂的性能和灵敏度进行评价,定期对实验室内部环境进行检测,确定实验室内部环境是否存在污染。”基因扩增实验室负责人陈克林说,“这些是获得准确数据的主要先决条件。”
“10平米的实验室,只有机器、病毒和我”
关闭大门,面积约10平方米的PCR实验室将被密封。这里平均气温28-9度,即使不穿防护服,也听不到外面的任何声音。厚厚的防护服,三层手套,全套防护装备,检查人员连续工作几个小时十几个小时,甚至在最忙的时候“战斗”一天一夜;在每一轮测试中,他们都要完成至少500次采样操作,按压移液器超过1500次,每天都要面对心理和生理两方面的测试。
“在这个10平米的实验室里,往往只有机器、病毒和我。”路宏说:“我们的战场就是这个只有十平方米的小木屋。我们的位置是一盘等待检测的病毒样本。我们的武器是在我们手中不断移动的移液器。”
“每个样本都被包裹在三层密封袋中,采集人员也会对密封袋和试管的表面进行消毒,但此时,如果采样管中有病毒,它仍然是‘活’的。”陈克林说,当检查人员从密封袋和开放的采样管中取出样本时,他们需要面对气溶胶飞溅的风险。
“前几天从实验室出来后,我觉得有点不舒服。我的体温超过37度,各种不好的想法在我脑海里闪过。”陈克林说:“理智告诉我,我没有流行病学接触史,我也严格按照操作规程开展检测工作。被感染的概率应该很低,但我的心还是紧绷着。”
“如果我不回家住酒店,如果我被感染了,会影响更多的人,我只能回家隔离自己。”那时候,陈克林戴着面具,把自己锁在房间里。“我的丈夫、孩子和公婆只隔了一扇门,我却不敢见他们。”。直到核酸检测呈阴性,体温恢复正常,她才放下心来。那一刻,所有的担心和压力都变成了眼泪,被释放了。
“2月14日,我检测到了北京天坛医院成为核酸检测单位后的第一份阳性样本。对我来说,这是一份特别的‘礼物’。”路宏说。
但对于这位经历过非典疫情的“老兵”来说,几个月内新地方集中疫情带来的压力超出了她的想象。
6月14日,医院接到紧急任务,要在24小时内完成7000多人的采样检测。“我们下午5点进入实验室,看到这么多样本,就想赶紧把它们全部做完,不知道花了多长时间。”路宏核酸检测团队成员李斯文说,他们只是在半夜离开实验室,但一眨眼,她就看到路宏回到了生物安全柜。
凌晨2点,新一批样品全部在电脑上测试。吕鸿和李斯文蜷缩在沙发上,睡了不到40分钟。他们被样本的铃声叫进实验室,直到早上7点才脱下防护服。
“有几次我回家坐在椅子上睡着了。梦里听到10岁的儿子在厨房收拾碗碟。我记得菜刀就在我旁边,我担心儿子会受伤,但我心里是这么想的,但我的身体不听指挥……”说到这里,路宏的眼睛红红的。“我儿子总是告诉我,‘妈妈,你得找到更多的病毒,我们才能打败它。’"
“有时候我累得坐在凳子上,在实验室睡着了,但我经常在电脑提取结束前三五分钟醒来。太神奇了,就像心里有个闹钟。”李斯文说道。
“检测组的成员都很年轻,每天只能睡几个小时,但没有人投诉,也没有人提出条件。和所有兄弟部门一样,他们都在默默的坚持和坚守。”张国军说。作为“系主任”,张国军的爱人也是一名医务工作者。他们的女儿今年参加了高考,但是两个人却在各自的医院奋战在抗击疫情的第一线,已经很久没有机会给女儿做饭了。“没什么,我侄女大,我们不用担心。”虽然表情很轻松,但大家眼中的“硬汉”说这句话的时候,显然是湿了眼眶。
迎接疫情,贡献“天坛力量”
随着新冠肺炎疫情的突然爆发,核酸检测已成为诊断的重要指标和临床实验室的一大考验。
1月26日,农历正月初二,检验科接到命令,准备进行新冠肺炎核酸检测。“晚上接到的订单要求两个PCR实验室的改造在一周内完成。”陈克林说,“当时对这种病毒还是很陌生的。如何保证安全,如何保证临床检验结果准确,是我们最大的顾虑,压力真的很大。”
在改革中,我们改进了安全计划、各种质量控制标准、各种扣减、演习和人员培训...像很多部门一样,核酸检测团队成员没有过春节,并在忙碌中马不停蹄地迎来了第一份核酸样本。
“第一波疫情给了我们锻炼的好机会。”张国军表示,第一次疫情对北京的影响相对较小,这也给了检查组时间完善流程,在实战中训练人员。
“2020年6月12日,一个值得纪念的日子……”这是张国军在他的QQ空里写的一句话,这位51岁的“督察”遭遇了“入职以来最大的挑战”。
6月11日突如其来的疫情打破了北京连续56天无新增本地确诊病例的平静;6月12日,北京天坛医院确诊“1号”“2号”病例;6月13日,疫情源头锁定在距离医院仅3.5公里的新市场;6月14日,医院和市场所在的胡阿祥地区被列为全国唯一的高风险地区...
短时间内,大量有新陆市场接触史的人群和发热患者涌入新陆周边唯一三甲综合医院北京天坛医院,迫切要求核酸检测;随着疫情的不断发展和核酸检测覆盖面的扩大,核酸检测队伍面临的压力从几百人增加到几千人、几万人,确诊病例数屡破纪录...
北京天坛医院两个PCR实验室有8套核酸检测设备;疫情初期,包括张国军主任在内,核酸检测团队共有9名成员。随着样本量的增加,实验室其他团队的支援力量被调动并扩大到19人。为了实现“第一次”,检查组几乎是随设备轮换。
“深夜的检测太‘痛苦’了。嗜睡缺氧会让人大脑混乱,但一定很辛苦。如果我们在一个环节掉链子,可能会影响抗疫的大事。”李思雯说,每天晚上,值班的两名检查人员会互相帮助,反复检查和确认操作过程,避免人为失误。
“第一次疫情爆发后,虽然每组都检测到阳性样本,但没有出现最初的紧张。主要是因为考试次数的突然增加,让我们在心理上措手不及。没有别的办法,我们只能互相扶持。这个时候,谁也不能掉链子。”路宏说。
除了一直坚守的“老兵”,核酸检测队伍也不断补充新鲜血液。陈宫出生于1997年。今年是工作的第一年,也是最年轻的成员。“第一次穿防护服我很兴奋,但是N95让我头脑发晕,在实验室的第三个小时我都无法呼吸。路宏老师说,不管你的技术如何,能不能熬过三个小时的窒息是首要条件。”陈宫接受了7天的“魔鬼训练”:每天完成正常工作后,她会穿上防护服,戴上护目镜,从下午3点开始练习往深孔板上添加样本。陈宫很快就会成为核酸检测队的生力军,从一开始他找不到小洞的时候,到现在他可以熟练地操作它。
除了医院领导和科室的支持,6月20日,广东多家医院的21名检验人员带着实验室,连夜赶往北京天坛医院。他们加入北京天坛医院核酸检测团队,组成“京广线核酸检测团队”,在12小时内经历了12635人次的检测,帮助北京天坛医院实现了每天1万管的核酸检测能力。
“北京已经好几天没有新增确诊病例了。经历过这场“战争”对我们每个人来说都是一次洗礼。随着住院患者数量的增加,我们的检测量并没有减少,我们的工作也不会停止。”张国军说。
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